Arrêté du 5 Safar 1425 correspondant au 27 mars 2004 rendant obligatoire la méthode de dénombrement des organismes microbiens pour le lait fermenté

En application des dispositions de l’article 19 du décret exécutif n° 90-39 du 30 janvier 1990, modifié et complété, susvisé, le présent arrêté a pour objet de rendre obligatoire une méthode de dénombrement des organismes microbiens pour le lait fermenté.

Pour le dénombrement des organismes microbiens du lait fermenté, les laboratoires du contrôle de la qualité et de la répression des fraudes et les laboratoires agréés à cet effet doivent employer la méthode d’analyse microbiologique décrite en annexe.

Cette méthode doit être également utilisée par le laboratoire lorsqu’une expertise est ordonnée.

Le présent arrêté sera publié au Journal officiel de la République algérienne démocratique et populaire.

Fait à Alger, le 5 Safar 1425 correspondant au 27 mars 2004.

Noureddine BOUKROUH. 3 Rabie Ethani 1425 JOURNAL OFFICIEL DE 23 mai 2004 ANNEXE Méthode de dénombrement des organismes microbiens dans le lait fermenté. 1°/ Définition :

On entend par « organismes de contamination » tous microorganismes autres que ceux responsables de fermentations spécifiques du type de lait fermenté considéré.

Les levures faisant partie de la flore spécifique à certains types de laits fermentés ne doivent pas être considérées comme des organismes de contamination. 2°/ Principe Un échantillon de lait fermenté est ensemencé sur un milieu rendu exempt de glucides qui est incubé à deux reprises; on dénombre ensuite les organismes de contamination. 3°/ Appareillage et verrerie :

Matériel courant de laboratoire. 4°/ Milieu de culture :

Le milieu de culture a la composition suivante :

Gélysate (*) ou équivalent........................................7,5 g Trypticase (*) ou équivalent.....................................7,5 g Chlorure de sodium (NaCL).....................................5,0 g Gélose (*).................................................................4,0 g Eau distillée.........................................................1000 ml Le pH du milieu après stérilisation....................7,6 ± 0,1 (*) rendu exempt de glucides. 5°/ Diluant :

Solution de Ringer au quart.

La composition de la solution concentrée de Ringer est la suivante :

Chlorure de sodium (NaCI)....................................9,00 g Chlorure de potassium (KCI).................................0,42 g Chlorure de calcium anydre (CaCI2).....................0.24 g LA REPUBLIQUE ALGERIENNE N° 32 17 Bicarbonate de sodium (NaHCO3)........................0.20 g Eau distillée (dans un appareil en verre).............1000 ml Pour l’emploi, ajouter une partie de la solution précédente à trois parties d’eau distillée (dans un appreil en verre).

— On peut également employer une solution de peptone à 0,1 % au lieu et place de la solution de Ringer diluée au quart.

— On peut également préparer le diluant à partir de tablettes prêtes à l’emploi.

— Tous les réactifs doivent être de qualité analytique. 6°/ Mode opératoire 6.1 Préparation des dilutions 6.1.1 L’échantillon sera conservé dans un réfrigérateur (3 à 4 °C) jusqu’à l’analyse bactériologique qui sera effectuée dans un délai maximum de 24 h après le prélèvement. 6.1.2 Prélever, en s’entourant des précautions aseptiques habituelles, un échantillion de 10 g de lait fermenté qu’on déposera dans un flacon ou récipient approprié, fermé à vis ou bouché, contenant 90 ml d’une solution de Ringer au quart et quelques perles de verre.

— Mélanger soigneusement en agitant le flacon 25 fois de haut en bas avec une amplitude de 30 cm environ.

— Le liquide est à utiliser pour la numération 1 ml correspondant à 100 mg de lait fermenté. 6.1.3 Afin d’obtenir la dilution au 1/100, transférer aseptiquement 1 ml du liquide (6.1.2) à 9 ml de solution de Ringer au quart, en mélangeant. Préparer, si nécessaire, une série de dilutions au 1/1000 à partir de la dilution au 1/100. 6.2 Incubation On fera incuber les boîtes de Pétri

— d’abord pendant 48 ± 2 heures à 30 ± 1 °C;

— puis pendant 48 ± 2 heures à 20 ± 1 °C. 7° Expression des résultats Exprimer le résultat du dénombrement en nombre de microorganismes par gramme de lait fermenté, c’est-à-dire le nombre de colonies x inverse de la dilution.

Dans certains cas, les bactéries lactiques donnent naissance à des « points de colonies ». Ces dernières ne doivent pas être comptées comme organismes de contamination. En cas de doute, effectuer l’épreuve de la catalase sur un nombre représentatif de colonies.

MINISTERE DE LA CULTURE